Producción de esterasa inducida por Tween 80 por Trichoderma harzianum en fermentación sumergida: Un ensayo de actividad de esterasa utilizando α-naftil acetato como sustrato
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Resumen
Tween 80 es un tensoactivo que se ha utilizado para diversos fines en cultivos microbianos. En estudios de biorremediación, la adición de tensoactivos en el medio es una práctica común, ya que hace que los sustratos hidrófobos estén disponibles para el microorganismo. En este trabajo se evaluó la influencia de Tween 80 (100 o 400 µL/L) en la producción de biomasa, contenido proteico, actividades de esterasa, y parámetros de crecimiento y rendimiento enzimático de Trichoderma harzianum crecido en fermentación sumergida. Se realizaron evaluaciones de las actividades de esterasa mediante pruebas bioquímicas y ensayos zimográficos utilizando como sustrato α-naftil acetato. Se observó una única banda con actividad de esterasa en las diferentes concentraciones de Tween 80 estudiadas. Sin embargo, 400 µL de Tween 80 indujeron una mayor producción de esterasa (148,2 U/L) en T. harzianum en comparación con la actividad de esterasa (79,5 U/L) mostrada en el medio añadido con 100 µL de Tween 80 por litro. Estos resultados mostraron que altas concentraciones (por ejemplo, 400 µL/L) de Tween 80 incrementaron la actividad de esterasa en T. harzianum. La única banda con actividad de esterasa revelada en los zimogramas sugiere que esta enzima (de 38 kDa aprox.) puede estar presente en ambas formas como esterasa constitutiva e inducible, ya que se observó en ambos medios, en el medio adicionado con glucosa y en el medio adicionado con Tween 80.
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