Las condiciones de cultivo y el método de recuperación impactan el rendimiento del ácido hialurónico producido por las cepas de Escherichia coli modificadas genéticamente

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Jorge de Jesús Ramos-Sánchez
Escarlett González-Morales
Juan Carlos Ramírez-Vázquez
Froylán M. Espinoza-Escalante

Resumen

El ácido hialurónico es un biopolímero presente en gran cantidad de estructuras biológicas y tiene actividad en múltiples procesos bioquímicos, es por ello que se ha buscado utilizarlo de forma artificial para el tratamiento de diversos padecimientos o con fines cosméticos. Actualmente, las bacterias recombinantes parecen ser una alternativa altamente viable para la producción biotecnológica de esta molécula ya que se pueden utilizar organismos no patógenos y en algunos casos incrementar el rendimiento. Puesto que las condiciones de cultivo impactan significativamente la producción de cualquier metabolito, se buscó determinar las mejores condiciones de cultivo en el biorreactor. Por lo tanto, en este trabajo presentamos el análisis bioingenieríl de la producción de ácido hialurónico utilizando dos cepas genéticamente modificadas de E. coli. Probamos dos plásmidos y tres parámetros fisicoquímicos en matraces. Además, se propone un nuevo método de extracción del ácido hialurónico. En este trabajo se demostró que la composición del medio, la aireación y la relación agitación/volumen, no así el plásmido extra, tienen impacto en la producción del biopolímero. Además, se pudo determinar que E. coli modificada con los genes PmHAS y kfid es viable para producir hasta 105 mg/L de ácido hialurónico cuando el medio de cultivo contiene una fuente de carbohidratos, como el glicerol, y se mantiene una aireación de alrededor de 1.5 vvm; lo cual se corroboró utilizando el método del carbazol con una modificación de la purificación del ácido generado.

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