Determinación de la presencia de M. bovis en muestras de tejido bovino mediante RT-PCR

Resumen

Se realizó la validación de la prueba de RT-PCR para diagnosticar tuberculosis bovina causada por M. bovis. Haciendo la comparación contra los resultados obtenidos previamente mediante cultivo en medio StonebrinkR. Con el fin de evaluar la sensibilidad y especificidad de la prueba y verificar si esta otorga una mayor proporción de verdaderos negativos y verdaderos positivos al diagnosticar dicha enfermedad a diferencia de la prueba de oro. Se usaron 100 tejidos bovinos positivos a M. bovis y 10 muestras negativas al mismo, se realizó extracción directa de ADN por el método de CTAB. Se realizó el protocolo de RT-PCR y los oligonucleótidos empleados y reportados por la United States Department of Agriculture (USDA). Los datos fueron procesados en el programa EPIDAT 3.1. Los resultados obtenidos fueron una sensibilidad del 92% y una especificidad del 100%, en un tiempo aproximado de 48 horas, detectando cantidades menores de 50 ng/µL de DNA.